Терапия опухоль-инфильтрирующими лимфоцитами помогает использовать собственные иммунные клетки пациента против опухоли. Но сегодня такой подход остаётся сложным, дорогим и связанным с токсичностью, поскольку для выращивания клеток обычно нужны высокие дозы стимулирующих веществ и дополнительные клетки-помощники. Новое доклиническое исследование показывает, что этот процесс можно упростить и сделать менее зависимым от высоких доз интерлейкина-2.
Что такое терапия опухоль-инфильтрирующими лимфоцитами
Опухоль-инфильтрирующие лимфоциты (tumor-infiltrating lymphocytes, TIL) — это иммунные клетки, которые уже проникли внутрь опухоли. Врачи могут извлечь их из опухолевой ткани пациента, размножить в лаборатории и затем вернуть обратно в организм, чтобы усилить атаку на рак.
Интерес к этому направлению вырос после того, как Управление по контролю за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств США (Food and Drug Administration, FDA) в 2024 году одобрило лифилеуцел для лечения некоторых взрослых пациентов с неоперабельной или метастатической меланомой. Метастатическая меланома означает, что опухоль распространилась за пределы первичного очага.
Однако стандартная технология выращивания TIL остаётся непростой. Обычно применяют высокие концентрации интерлейкина-2 (interleukin-2, IL-2) — сигнального белка, который стимулирует рост T-клеток. T-клетки — это лимфоциты, способные распознавать и уничтожать заражённые или опухолевые клетки.
Кроме того, традиционные протоколы используют фидерные клетки — вспомогательные клетки, которые поддерживают размножение TIL в культуре. Чаще всего это облучённые мононуклеарные клетки периферической крови. Они уже не должны делиться, но создают условия для роста нужных иммунных клеток.
Почему высокие дозы интерлейкина-2 — проблема
Высокие дозы интерлейкина-2 помогают быстро увеличить число TIL, но у подхода есть обратная сторона. Такая стимуляция может способствовать истощению T-клеток. Истощение означает, что клетки внешне остаются живыми, но хуже распознают опухоль, слабее делятся и менее эффективно атакуют раковые клетки.
После введения TIL пациентам часто требуется системное, то есть действующее на весь организм, введение высоких доз интерлейкина-2. Это может сопровождаться серьёзными побочными реакциями, поэтому исследователи ищут способы сохранить противоопухолевую активность TIL без такой нагрузки.
Ещё одна трудность — иммунное ускользание опухоли. Некоторые опухолевые клетки уменьшают количество молекул главного комплекса гистосовместимости I класса (major histocompatibility complex class I, MHC-I) на своей поверхности. Эти молекулы показывают иммунной системе фрагменты белков внутри клетки. Если MHC-I становится меньше, CD8-положительным T-клеткам труднее распознать опухоль.
Как устроена новая система выращивания клеток
Исследователи разработали систему выращивания TIL без фидерных клеток и с меньшей зависимостью от интерлейкина-2. В первой фазе, до быстрого размножения клеток, TIL культивировали с низкой концентрацией интерлейкина-2 — 2000 международных единиц на миллилитр — и добавляли интерлейкин-7 и интерлейкин-15. Эти сигнальные белки также помогают T-клеткам выживать и сохранять функциональность.
Во второй фазе, во время быстрого размножения, концентрацию интерлейкина-2 снижали до 300 международных единиц на миллилитр. Вместо фидерных клеток использовали совместную стимуляцию через CD3 и CD28. CD3 и CD28 — молекулы на поверхности T-клеток, через которые можно подать им сигнал к активации и делению.
Такой подход успешно работал как минимум в 90% образцов при нескольких видах солидных опухолей, то есть опухолей, образующих плотный очаг в органах и тканях. Среди них были меланома, рак поджелудочной железы, рак желудка, рак шейки матки и колоректальный рак. TIL, полученные из меланомы, увеличивались примерно в 2500 раз.
Полученные клеточные продукты имели высокую чистоту: доля клеток с маркерами CD45 и CD3 превышала 93%. CD45 — общий маркер клеток крови иммунного происхождения, а CD3 указывает на принадлежность к T-клеткам. Эти TIL активно выделяли интерферон-гамма (interferon-gamma, IFN-γ) — сигнальную молекулу, связанную с противоопухолевым иммунным ответом, — и уничтожали опухолевые клетки сильнее при увеличении соотношения иммунных клеток к клеткам-мишеням.
Меньше признаков истощения и усиление за счёт блокады PD-1
Особенно важно, что выращенные клетки имели признаки менее истощённого состояния. У них почти не выявлялась экспрессия белка программируемой клеточной гибели 1 (programmed cell death protein 1, PD-1): показатель был ниже 0,5%. PD-1 — это один из «тормозов» иммунной системы. Когда он активно работает, T-клетки могут слабее атаковать опухоль.
В модели колоректального рака, созданной с использованием опухолевой ткани пациента, добавление низкой дозы блокады PD-1 к TIL-терапии заметно усиливало противоопухолевый эффект. Объём опухоли был ниже, чем в контрольной группе, а животные лучше сохраняли массу тела. Кроме того, комбинация полностью предотвращала изъязвление опухоли — осложнение, которое наблюдали в группах без такой комбинации.
Блокада PD-1 уже широко используется в онкологии в виде ингибиторов контрольных точек иммунитета. Эти препараты снимают часть тормозящих сигналов с T-клеток и помогают иммунной системе активнее атаковать рак. В данном исследовании низкая доза такого воздействия рассматривалась как возможная альтернатива поддержке высокими дозами интерлейкина-2 после введения TIL.
Гидроксихлорохин показал интересный, но ограниченный эффект
Авторы также изучили гидроксихлорохин как вещество, способное менять иммунное взаимодействие опухоли и T-клеток. В лабораторных условиях гидроксихлорохин повышал экспрессию MHC-I на опухолевых клетках, не увеличивая уровень лиганда программируемой клеточной гибели 1 (programmed death-ligand 1, PD-L1). PD-L1 — это молекула, с помощью которой опухоль может подавлять активность T-клеток через путь PD-1.
При этом гидроксихлорохин не мешал размножению TIL и усиливал раннее уничтожение опухолевых клеток T-клетками с инженерно изменённым T-клеточным рецептором (T-cell receptor-engineered T cells, TCR-T cells). Такие клетки специально настраивают на распознавание опухолевых мишеней.
Однако в опытах на животных польза гидроксихлорохина была ограниченной. Поэтому авторы рассматривают этот результат как направление для дальнейшего изучения, а не как готовую лечебную схему.
Что это может изменить для пациентов
Главное значение работы — в попытке сделать TIL-терапию проще и потенциально безопаснее. Отказ от фидерных клеток может облегчить производство клеточного препарата, а снижение доз интерлейкина-2 — уменьшить риск токсичности и клеточного истощения.
Если результаты подтвердятся в более крупных исследованиях и затем в клинических испытаниях, такая стратегия может расширить применение TIL-терапии при солидных опухолях. Особенно это важно для пациентов, у которых остаётся мало вариантов лечения.
Но пока исследование остаётся доклиническим. Это означает, что основные выводы получены в лабораторных условиях и на моделях опухоли, а не в полноценном испытании у большой группы пациентов. Следующие шаги должны показать, насколько долго такие TIL сохраняются в организме, как они взаимодействуют с опухолевым микроокружением и можно ли безопасно воспроизвести эффект у людей.
Об исследовании сообщает Китайская академия наук (Chinese Academy of Sciences). Работа опубликована в журнале Cancer Biology & Medicine. Эта статья дополняет более широкую линию исследований о том, как опухоли уходят от иммунного ответа: ранее МКБ-11 писал, что потеря MHC-I может не только помогать раку скрываться, но и создавать новую уязвимость для иммунной атаки.
Литература
Zhang Y., et al. Expansion of IL-2-independent tumor-infiltrating lymphocytes through a feeder-free process: a preclinical study for solid tumors // Cancer Biology & Medicine. — 2026. — DOI: 10.20892/j.issn.2095-3941.2025.0441.